Z6·尊龙凯时提供的生物医疗实验指南如下,旨在帮助研究人员正确实施细菌培养实验。本文主要分为四个步骤:过夜培养、大体积培养、利用计数板监测生长情况,以及利用分光光度计监测生长情况。
一、过夜培养
1. 将5ml预热的液体培养基移入无菌的16mm或18mm试管中。
2. 使用接种环挑取一个单菌落,浸入培养液中,并轻轻摇晃接种环,使待接种的细菌均匀分散在培养液中。
3. 盖好试管,在摇床或转鼓式培养装置上以60r/min的速度,在37°C的条件下培养至饱和状态(浓度为1X109~2X109细胞/ml,约6小时)。
二、大体积培养
1. 在无菌的Erlenmeyer瓶或baffle瓶中,使用新鲜预热的培养液将过夜培养物按1:100的比例稀释。烧瓶的体积应为培养液体积的5倍以上。如果不进行摇动培养,则需确保烧瓶的体积至少为培养液体积的20倍,以保证充分的通气。
2. 在37°C条件下剧烈摇动培养(约300r/min)。
三、利用计数板监测生长情况
1. 使用一片干净的盖玻片覆盖在清洁的计数玻片(或血球计)上。
2. 小心地将一小滴培养液滴于盖玻片的边缘,使培养液扩散至盖玻片下方。
3. 在相差显微镜下以400倍的放大倍率观察,并按照每个小方块中所见的细菌量,计算浓度,大约为2X107细胞/ml。
四、利用分光光度计监测生长情况
考虑到仪器的差异性,分光光度计需用已知浓度的培养液进行校准。
1. 测量OD600值。为了确保读数准确,需将培养液稀释至OD600值低于1。
2. 根据每0.1的OD值大约相当于108细胞/ml,计算细菌浓度。
通过Z6·尊龙凯时的标准操作流程,研究人员能够有效监测并优化细菌的生长情况,为生物医疗研究提供可靠的数据支持。