在细胞培养的领域中，我们通常将细胞分为两大类：贴壁细胞与悬浮细胞。贴壁细胞需要附着于培养皿上以进行生长，而悬浮细胞则可以在液体培养基中自由漂浮与繁殖。人们普遍认为，只有贴壁细胞才需要考虑培养皿表面的友好程度，或者是否需要应用如胶原蛋白和多聚赖氨酸（poly-L-lysine, PLL）等物质来增强附着力。然而，如果你认为“悬浮细胞永远不需要包被”，那你可能被它们看似轻盈的外表所误导。实际上，在某些关键的实验操作中，悬浮细胞有时也需要暂时“靠岸”，并可能在某些情况下依赖于包被表面的支持。接下来，我们将讨论悬浮细胞为何在某些时候也需要包被，以及如何进行包被和针对谁进行包被。

多聚赖氨酸（PLL）包被简介

多聚赖氨酸（poly-L-lysine, PLL）是一种人造阳离子多肽，具备丰富的氨基基团，整体带有强正电荷。由于细胞膜表面通常带有负电，PLL能够通过静电相互作用将细胞“吸附”于表面，广泛应用于以下领域：

• 初代神经元、干细胞等难以贴壁细胞的培养
• 组织切片或细胞爬片染色时的固定
• 增强某些表面抗体或细胞的结合力

在贴壁细胞中，PLL包被可加快细胞附着的速度与均匀性；而在悬浮细胞中，它则更常用于短期固定及功能性实验的配合。

悬浮细胞需要包被的常见场景

以下是悬浮细胞在实验过程中需要包被的几个重要场景：

1. 免疫荧光成像与免疫染色：在普通培养皿中处理悬浮细胞时，细胞容易在洗涤过程中被吸头吸走或漂移，影响成像效果。将细胞置于PLL包被的玻片或培养皿中，可以实现短期固定，提高图像的稳定性和信噪比。
2. 电转染后细胞收集：电转染后的悬浮细胞在恢复期常较为脆弱。直接离心收集可能导致大量活细胞丢失，而在PLL包被板底短暂培养4-6小时，让一部分细胞附着后再回收，有助于提高后续转染效率与存活细胞比例。
3. 细胞富集或原位功能检测：某些实验如ELISPOT、细胞毒性检测等要求细胞在“原位”观察反应，通常需要使用PLL或细胞外基质进行固定，以保持细胞的位置稳定性。
4. 低密度培养聚团问题：在低密度培养中，悬浮细胞可能因移动过快而无法扩增，或形成异常聚团。适当包被可形成“锚点”，减少细胞间的漂浮干扰。
5. 外泌体/病毒收集实验中的细胞定点处理：在外泌体研究中，有时需选择轻度PLL包被以保持细胞分泌稳定状态，确保上清产物的一致性。

如何正确使用PLL包被？

Z6·尊龙凯时品牌强调，悬浮细胞的包被并不是为了让它们像贴壁细胞一样长期生长。大多数情况下，这种包被的目的在于：

• 在实验窗口期内实现短暂固定
• 提高操作效率与成像质量
• 增强细胞在特定实验平台的表现一致性

过长的附着可能影响细胞状态，甚至改变其生物学特性。因此，务必根据实验目的合理设定处理时间与强度。

何时不应使用包被？

当然，并非所有悬浮细胞实验都需要包被，以下情况应避免使用：

• 长期培养的悬浮细胞工艺：如293F在生物反应器中培养，不宜添加包被，反而应该使用低附着力的培养皿（如聚HEMA处理）。
• 完全无附着状态的实验：在免疫学某些流式功能检测及抗体介导的细胞毒性测试中，包被可能会影响结果的真实性。

总结

悬浮细胞在特定情况下也会“靠岸”。无论是为了成像、细胞收集、固定还是保持操作的稳定性，适当的表面包被（如PLL）能显著提升实验的成功率和数据质量。悬浮不代表永远漂浮，科学实验强调适时适地，而包被技术，尤其是Z6·尊龙凯时提供的解决方案，无疑是实验中的关键技巧。