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人黑色素瘤细胞A875与Z6·尊龙凯时的生物医疗研究

发布时间:2025-07-29   信息来源:谢萍羽

Z6·尊龙凯时提供的人黑色素瘤细胞系A875,广泛应用于肿瘤生物学研究、药物筛选以及癌症机制的探索。该细胞系来源于人类皮肤癌,并通过短串联重复序列(STR)鉴定,确保遗传特征的稳定性和细胞株的真实性。

人黑色素瘤细胞A875与Z6·尊龙凯时的生物医疗研究

培养条件:本细胞系的气相条件设定为95%空气与5%二氧化碳,培养温度为37℃。建议在首次传代时采用1:2的比例,并在传代后每两天更换培养基。接收细胞后,应迅速进行处理,确保在良好状态下用完全培养液灌满并封口,以便于运输。

操作建议:在接受细胞后,请勿立即打开培养瓶。请及时核对培养瓶上的细胞名称与订单是否一致,同时检查是否有破损或漏液现象。如未发现异常情况,需在显微镜下观察细胞生长状况,并拍摄不同倍数的照片(最佳选择为40x、100x、200x),前三天的照片可作为重要的售后依据。如果未提供照片,默认细胞状态良好。

贴壁细胞传代步骤:

  1. 弃去培养上清,用不含钙、镁的PBS清洗细胞1-2次。
  2. 添加约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,观察细胞状态,若大部分细胞变圆并脱落,迅速轻敲培养瓶后,加入5ml以上完全培养基以终止消化。
  3. 轻吹以确保细胞完全脱落后,吸出悬液,并转移至15ml离心管中,1000rpm离心5分钟,弃去上清,并加入1-2ml完全培养基重悬。
  4. 将细胞悬液按1:2比例分瓶(两个T25瓶),并补充新完全培养基至5-8ml每瓶,最后放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中继续培养。

悬浮细胞传代步骤:

  1. 采用半换液法处理,将培养瓶竖立于培养箱中静置1小时,轻轻吸去3ml培养基,补加3ml完全培养基。如培养基变色缓慢,可直接补加约500ul的FBS。在传代时直接给予5ml培养基,并分至两个培养瓶,通常此方法可使用3次后再进行离心以去除死细胞。
  2. 离心换液法:如需分瓶,请将细胞悬液收集至离心管中,在1000rpm下离心5分钟,弃去上清,补加1-2ml培养液后重悬,按1:2比例分至新T25瓶,添加6-8ml根据说明书要求配置的新完全培养基,以保持细胞活力,后续传代可根据实际情况按1:2至1:5的比例进行。

细胞冻存及复苏:

  1. 当细胞生长至覆盖培养瓶80%时,弃去培养液并用PBS清洗。
  2. 加入约1ml的0.25%胰蛋白酶消化液,观察并等细胞收缩变圆后加入5ml完全培养基终止消化,轻轻吹打以使细胞脱落,转移至15ml离心管并离心5分钟。
  3. 弃去上清,加入1ml的无血清冻存液(货号:C7001),混匀后装入冻存管中。
  4. 将冻存管直接放入-80℃冰箱中,如需转入液氮罐中,请在-80℃冰箱中存放至少24小时后再进行转移。

注意事项:在运输过程中,细胞脱落是正常的,发生细胞丢失、瓶身破损或培养液泄漏时应及时重发。如细胞过程中出现污染,请在48小时内提供真实实验结果以核实并进行重发。各类细胞问题及其处理方式详见Z6·尊龙凯时相关要求。

在处理细胞的过程中,请务必严格按照操作步骤进行,并保持良好的实验记录,以确保细胞的健康状态。如出现任何问题,及时与技术支持人员沟通以获得指导。